黎明与黑夜两大阵营的对抗是核心玩法之一。黎明使者阵营的代表英雄包括瑞文、卡莉斯塔、盖伦等，他们通过羁绊效果提供团队增益和生存能力。瑞文作为主C时，搭配4黎明使者羁绊可触发高额护盾与伤害加成，而卡莉斯塔则能通过征服者羁绊提升攻速与续航。黑夜使者阵营则以亚索、厄斐琉斯、皎月等英雄为主，其羁绊效果在生命值低于50%时提供护盾与额外伤害，尤其亚索的真实伤害机制能有效克制高护甲阵容。
黑夜使者阵容中，亚索是核心输出，需配备火炮、飓风等攻速装备以确保输出效率，同时依赖黑夜使者羁绊的护盾增强生存能力。厄斐琉斯则作为游侠体系的主C，通常搭配饮血剑与羊刀，在铁甲卫士的保护下持续输出。皎月作为刺客单位，负责切入后排并施加控制，装备以冰霜之心等功能性装备为主。这两大阵营的英雄搭配需根据对局情况灵活调整，例如面对法师阵容时可补充秘术师羁绊。
黎明使者阵容的运营思路偏向中期发力，利用瑞文和盖伦的坦度与伤害快速建立优势。黑夜使者则更依赖装备与星级，尤其是亚索的三星成型后能显著提升阵容上限。两者的共同点在于都需要合理分配经济，确保关键英雄的星级与装备优先级。黎明阵营需优先合成瑞文的输出装，而黑夜阵营则需确保亚索的火炮与吸血装备。
在实战中，黎明与黑夜阵容的克制关系较为明显。黑夜使者亚索凭借真实伤害对重骑、铁甲等前排阵容有天然优势，而黎明使者则擅长对抗爆发不足的持续输出阵容。玩家需根据对手的阵容动态调整站位与装备，例如将亚索置于第二排避免被集火，或为瑞文补充水银防止控制打断技能。
黎明与黑夜阵营的玩法差异显著，但均需注重羁绊联动与装备搭配。玩家可通过观察对手阵容选择针对性策略，例如优先抢夺反曲弓等关键装备，或在中期转换阵容以应对局势变化。这两大阵营的深度与灵活性为游戏提供了丰富的战术选择。
